Infecciones por el virus EV-D68 en niños hospitalizados en un hospital de alta complejidad / EV-D68 virus infections in children admitted to a tertiary-care hospital

Introducción: Los reportes de infecciones por enterovirus D68 (EV-D68) han aumentado en los últimos años. Material y métodos: Cohorte prospectiva. Se realizó la búsqueda de EV-D68 en niños internados en el Hospital de Pediatría Juan P. Garrahan entre 1-5-2016 y 30-9-2016 con: infección respiratoria aguda baja (IRAB) que requirieran cuidados intensivos, parálisis aguda fláccida (PAF) asimétrica con compromiso de sustancia gris en resonancia magnética nuclear (RMN) o identificación de cualquier enterovirus con cuadro clínico compatible. La identificación de EV-D68 se realizó en el Servicio de Neurovirus, Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas INEI-ANLIS "Dr. CG. Malbrán". Resultados: n: 6. PAF: cuatro niños presentaron PAF asimétrica, con arreflexia y RMN compatible con mielitis. Requirieron ventilación mecánica en unidades de cuidados intensivos (UCI) dos de los 4 niños. Todos presentaron parálisis residual. Se identificó EV-D68 en secreciones nasofaríngeas (SNF) de todos ellos. En líquido cefalorraquídeo sólo en uno. Miocarditis: Una niña sana de 5 años se internó en UCI por disfunción miocárdica y fiebre. Presentaba además derrame pericárdico moderado. Recibió gamaglobulina e.v. con buena evolución. En SNF se identificaron virus sincicial respiratorio (VSR) y EV-D68. IRAB grave: se identificó EV-D68 en un paciente de 14 meses que permaneció en UCI por IRAB grave con requerimientos de ventilación no invasiva por 72 hs, con buena evolución posterior. Se constató coinfección VSR y EV-D68 en SNF. Conclusiones: Se reportan 6 pacientes internados con infección por EV-D68. La vigilancia epidemiológica activa es esencial para identificar la circulación, las características clínicas y el pronostico de las infecciones por virus emergentes (AU)

Introduction: Reports on enterovirus D68 (EV-D68) infections have increased over the past years. Material and methods: A prospective cohort study. A search for EV-D68 infection was conducted in children hospitalized at Hospital de Pediatría Juan P. Garrahan between 1-5-2016 and 30-9-2016 with: acute lower respiratory infection (ALRI) requiring intensive care unit (UCI) admission, acute flaccid paralysis (AFP), asymmetry with grey matter involvement on magnetic resonance imaging (MRI), or identification of any enterovirus associated with compatible features. The identification of EV-D68 was performed at the Department of Neuroviruses of the InstitutoNacional de EnfermedadesInfecciosas INEI-ANLIS "Dr. CG. Malbrán". Results: n: 6. AFP: four children had asymmetric AFP with areflexia and MRI compatible with myelitis. Two of four required mechanical ventilation in the ICU. All of them presented with residual paralysis. EV-D68 was identified in the nasopharyngeal swab (NPS) in all of them and in the cerebrospinal fluid in only one. Myocarditis: A 5-year-old healthy girl was admitted to the ICU because of myocardial dysfunction and fever associated with moderate pericardial effusion. She was put on IV gamma globulin with a good response. In the NPS respiratory syncytial virus (RSV) and EV-D68 were identified. Severe ALRI: EV-D68 was identified in a 14-month-old patient who was admitted to the UCU because of severe ALRI requiring non-invasive ventilation for 72 hours with a good outcome. A RSV and EV-D68 coinfection was found in the NPS. Conclusions: We report six inpatients with a EV-D68 infection. Active epidemiological surveillance is crucial to identify circulation of the virus, clinical features, and prognosis of emerging viruses (AU)

Brote epidémico de meningitis viral causado por echovirus tipo 4 en la provincia de Misiones / Outbreak of viral meningitis caused by echovirus type 4 in Misiones province

Se realizó un estudio retrospectivo a fin de describir un brote epidémico de meningitis causado por enterovirus, que comprometió a 143 niños de 1 mes a 14 años internados en el Hospital Pediátrico de Posadas (Misiones) con diagnóstico de meningitis aséptica, entre agosto y diciembre de 2005. Se observó un aumento de casos entre las semanas 33 a 50, con un pico máximo entre las semanas 47 y 48, lo que confirmó el brote. La mediana de edad de los niños afectados fue de 8 años y el 55,2% fueron varones. El 80% de los casos se observó entre escolares (5 a 14 años). El promedio del tiempo de internación fue de 4,5 ± 1,7 días, y no se registraron fallecidos. Los LCR se estudiaron mediante examen citoquímico y estudios bacteriológicos y virológicos (aislamiento viral, RT- PCR anidada e identificación molecular mediante secuenciación génica). Los recuentos de células en LCR variaron entre 6 y 5040 células /mm3, el 92% fueron inferiores a 500 células/mm3 y el 43,5% mostró predominio linfocitario. El 56% presentó concentraciones de glucosa normal, con proteínas ligeramente elevadas. El 28% de las muestras estudiadas por cultivo (17/60) mostró efecto citopático, compatible con enterovirus. La RT-PCR anidada permitió detectar enterovirus en un 73% de las muestras (43/59), con 6 casos que se tipificaron como echovirus tipo 4. El índice de positividad al combinar ambas técnicas alcanzó el 83%.

A descriptive retrospective study was carried out to describe an epidemic outbreak of enteroviral meningitis in Misiones. We reviewed records of 143 children from 1 month to 14 years of age who were hospitalized with aseptic meningitis in the Pediatric Hospital of Posadas from August to December 2005. Increased number of cases was observed between weeks 33 to 50 which reached a maximum peak in weeks 47 and 48, confirming an outbreak. The median of age was 8 years old, 55.2% were males. Eighty percent of cases were in 5 to 14 years old children. The average length of time spent in the hospital was 4.5±1.7 days, no deaths were reported. We performed cell counts, chemical and bacterial studies of CSF, and culture or RT-Nested/PCR for enteroviruses. Isolates were serotyped by RT-PCR amplification and genetic sequencing. Cell counts were from 6 to 5040 cells/mm3. Ninety two percent had less than 500 cells/mm3 and 43.5% had lymphocyte predominance. Glucose levels were normal with slightly elevated protein counts in 56% of cases. Of the cultured samples, 28% (17/60) showed cytopathic effect compatible with enterovirus. RT-n-PCR detected enterovirus in 73% (43/59) of the analyzed CSF. Echovirus type 4 was identified in 6 of them. The positive indicator obtained by combining both techniques was 83% (58/70).

Herpes virus simple como probable factor etiologico de la paralisis periferica aguda idiopatica en la infancia / Herpes simplex virus as a probable cause of idiopathic peripheral facial paralysis in children

Durante dos años se realizó el diagnóstico y seguimiento clínico de 270 niños con parálisis facial periférica aguda idiopática (PFPAI). El objetivo del trabajo fue estudiar la serología para herpes virus simple menos 1 (HVS menos 1) y señalar su posible asociación con la enfermedad. Ciento sesenta y nueves niños cumplieron con los criterios con de inclusión. Se analizaron IgG para HVS1 y citomegalovirus (CMV) por enzimoinmunoensayo (ELISA); IgM, HVS menos 1, CMV VZV por nmunofluorescencia indirecta (IFI). La muestra inicial se tomó en los primeros 15 días de evolución del cuadro. En 13 casos seleccionados al azar se tomaron muestras adicionales durante el período de estado y/o remisión. Los resultados del grupo PFPAI se compararon con los de dos grupos controles: A)Sin parálisis facial periférica (PFP) (n igual 42) y B)con PFP secundarias (n igual 15). Las IgG, HVS menos 1 fueron (más) en 163/169 casos con PFPAI, los 6 restantes tuvieron IgM, HVS menos 1 (más). Los títulos de IgG CMV y VZV fueron mas o menos 1/400 y las IgM (menos). En todas las PFP secundarias las IgG HVS menos 1 fueron más o menos 1/400; en los casos sin PFP, los títulos de IgG HVS menos 1 fueron 50 por ciento negativos, 17 por ciento más o menos 1/400 y 33 por ciento más o menos 1/800. Las IgM HVS 1 fueron negativas en los grupos control. En el grupo PFPAI, el porcentaje de pacientes con IgG HVS 1 más o menos 1/800 y/o IgM (más) fue del 80,6 por ciento (p mayor 0.001). En base a estos resultados, las curvas se realizaron sólo para IgG HVS 1 observándose una caída más o menos 2 diluciones asociada a franca mejoría clínica o remisión de la enfermedad. Conclusión: estos resultados señalan al HVS 1 como posible agente etiólogico de la PFPAI en la población estudiada

Enfermedad neurologica por adenovirus / Neurologic disease due to adenovirus infection

El objetivo de este trabajo fue determinar la prevalencia de adenovirus (ADV) en las infecciones del sistema nervioso central (SNC). Se analizaron 108 muestras de líquido cefalorraquídeo (LCR) provenientes de 79 casos de encefalitis, 7 meningitis y 22 de otras patologías neurológicas, recibidas en el período 2000-2002. Cuarenta y nueve (47.35%) se obtuvieron de pacientes inmunocomprometidos. La presencia de ADV se investigó mediante reacción en cadena de la polimerasa en formato anidado (Nested-PCR). La identificación del genogrupo se realizó mediante análisis filogenético de la secuencia nucleotídica parcial de la región que codifica para la proteína del hexón. Se detectó la presencia de ADV en 6 de 108 (5.5%) muestras de LCR analizadas. Todos los casos positivos pertenecieron a pacientes con encefalitis que fueron 79, (6/79, 7.6%). No se observó diferencia estadísticamente significativa entre los casos de infección por ADV en pacientes inmunocomprometidos e inmunocompetentes (p>0.05). Las cepas de ADV detectadas se agruparon en los genogrupos B1 y C. En conclusión, nuestros resultados describen el rol de los ADV en las infecciones neurológicas en Argentina. La información presentada contribuye al conocimiento de su epidemiología, en particular en casos de encefalitis.

Estudio de sensibilidad antiviral de virus herpes simplex en pacientes trasplantados / [Antiviral sensitivity of herpes simplex virus in immunocompromised patients]

The Herpes simplex Virus (HSV) resistance to acyclovir (ACV) occurs in a 5

of the inmunocompromised patients, approximately. The treatment with analogs of nucleosides, causes the appearance of resistent HSV-ACV stocks (ACVr) which can be produced by alteration in genes coding for the TK or the DNA-polymerase. A previous large-scale clinical study on ACVr HSV strains isolated from patients infected with human immunodeficiency virus indicated that 96

of ACVr HSV mutants were low producers of, or deficient in, TK activity (TK-), with 4

being TK mutants with an altered substrate specificity. No DNA Pol mutants were isolated. The pirophosphate analogs generate resistance in the gene of DNA-polymerase by mutation. In this paper we show the methodology used for the determination of sensibilite profiles to ACV and Phoscarnet (PFA) in a population of inmunocompromised patients. We analized 46 HSV strain from vesicular injuries of transplanted patients. All samples, were inoculated in human fibroblasts and the HSV isolates were identified by inmunofluorescence whith monoclonal antibodies. These strains were amplified and the profile of susceptibility determinated in Vero cells, using 100 tissue culture inhibition dosis 50 (TCID50) of each Viral stock and the specific antiviral drugs in different concentrations. The cytopathic effect (CPE) was evaluated after 72hs. post infection. The 50

inhibitory concentration (CI50) was calculated from the percentage of inhibition of the ECP based on the concentration of the drug. From 46 isolations, 26 were HSV-1 and 20 were HSV-2. Two of them, one HSV-1 and one HSV-2, were resistant to ACV and none of the isolates were resistant to PFA.

RT-nested PCR for the detection of enterovirus in biological samples from patients with suspected enteroviral infections

In this study, we have tested a reverse transcription (RT) nested polymerase chain reaction (nPCR) for detection of enterovirus (EV) RNA in cerebrospinal fluid (CSF), serum samples, and conjunctival swabs (CS) from patients with suspected enterovirus infections. A specific 113-bp fragment was amplified using primers designed based on 5' non coding region of the enterovirus genome. The enterovirus RT-nPCR was able to detect 0.001 plaque forming unit (pfu)/ml. Since no PCR product was detected in each of the CSF, CS and serum samples from patients with proven-non-enterovirus viral infections, this method was found to be specific. EV RNA was detected in all 30 culture-confirmed CSF samples and yielded positive results in 5 out of 7 additional cases of culture-negative CSF samples with other evidences of enterovirus infection. Overall, EV RNA was detected in 95 of the patients with clinical diagnosis of viral central nervous system (CNS) disease and confirmed enterovirus infection. Furthermore, we were able to detect EV RNA in 24 (47) out of 51 CSF samples from patients with clinical diagnosis of viral CNS disease and negative laboratory evidence of viral infection. The percentage of positive EV RNA detection in paired CSF and serum samples from 11 patients with an enterovirus isolate in CSF was 100 (11 of 11) and 73 (8 of 11), respectively. In addition, EV-specific IgM was detected in 64 (7 of 11) of the sera tested. The method was also tested against 136 samples of CS from patients with clinical diagnosis of acute hemorrhagic conjunctivitis. Ninety nine of them resulted positive (73), while only 27 (20) had been positive for viral culture. In summary, our study shows the importance of enterovirus RT-nPCR for the diagnosis of enterovirus associated disease in different kind of biological samples and different types of diseases.